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直播答疑 | 細胞培養(yǎng)答疑專場

12月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態(tài)變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題，直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號留言，我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎？消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變，最直觀的表現(xiàn)就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對細胞損傷小還是機械吹打?qū)毎麚p傷小？建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有...

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細胞學堂 | A-498細胞知識盤點

A-498（人腎癌細胞）細胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細胞系。該細胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應(yīng)用價值，常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應(yīng)用，幫助您快速上手開展實驗。細胞形態(tài)A498細胞貼壁生長，呈上皮樣形態(tài)，細胞鋪開面積大，單位面積細胞總數(shù)量少，少量細胞有觸角；低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣，密度大于100%時邊緣不清晰，細胞與...

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細胞學堂 | 實驗室細胞計數(shù)指南

細胞計數(shù)是實驗室中常見的一項操作，用于確定樣品中細胞的數(shù)量，判斷細胞數(shù)量是否滿足實驗需求。本期細胞學堂為大家整理了幾種常見的計數(shù)方法：人工手動計數(shù)法、自動細胞計數(shù)儀法，以及懸浮細胞和貼壁細胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍，幫助您快速上手開展實驗。1人工手動計數(shù)法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細胞數(shù)量，從而進行統(tǒng)計。操作步驟1將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上；2輕輕吹打細胞懸液，使細胞均勻分布；吸出10μL-20μL左右的細胞懸液滴在蓋片邊緣，使細胞懸液充滿蓋玻...

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直播答疑 | 懸浮細胞培養(yǎng)要點解析

11月16日，普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細胞的生長特點、培養(yǎng)注意事項，并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個細胞案例，深入講解了懸浮細胞的培養(yǎng)要點。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在推文底部留言，我們將在線解答。Q1傳代時，細胞密度比較低，但是培養(yǎng)基又變黃了，怎么辦？細胞培養(yǎng)過程中，如發(fā)現(xiàn)細胞量較少，但培養(yǎng)基變黃較快，可以從以下3個方面進行排查：?檢查培養(yǎng)...

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細胞學堂 | 培養(yǎng)B16系列細胞必看知識點

B16系列細胞屬于小鼠黑色素瘤細胞系，是源自C57小鼠的一種皮膚癌細胞，常用于腫瘤生物學研究。本期細胞學堂為大家整理了B16系列細胞的培養(yǎng)方法與注意事項，B16細胞黑色素的形成原因及解決方法，幫助您快速上手開展實驗。01B16系列細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)條件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生長特性貼壁生長，生長迅速，能產(chǎn)生黑色素；傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推薦傳代比例1:3-1:...

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培養(yǎng)基成分的稱取、分裝及保存！

培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分必須**稱取并要注意防止錯亂，*好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。稱取完畢后，還應(yīng)進行一次檢查。培養(yǎng)基的分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時*好能使用半自動或電動的定量分裝器。分...

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細胞學堂 | 手把手教你培養(yǎng)SV-HUC-1

SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細胞)，是由猿猴空泡病毒40轉(zhuǎn)染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細胞，而建立起來的永生化細胞系。其分化特性與正常細胞相似，培養(yǎng)簡單，可無限傳代，卻不屬于腫瘤細胞[1]?；A(chǔ)信息?生長培養(yǎng)基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S?生長特性：貼壁，上皮細胞樣?推薦傳代比例：1:2-1:4?推薦換液頻率：2~3次/周?培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃?凍存條件：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-...

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直播答疑 | 原代細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案

原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首-次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是細胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細胞常見問題解決方案”課程中，有很多老師就原代細胞培養(yǎng)問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細解答。臍靜脈內(nèi)皮細胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內(nèi)皮細胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細胞形態(tài)會比不包被的好看。角質(zhì)細胞需要包被嗎？角質(zhì)細胞生長類似上皮細胞，營養(yǎng)環(huán)境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細胞原皿狀態(tài)很好，傳代后細胞邊界不清楚是什么原...

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