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胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中主要起到什么作用?
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中主要起到什么作用?
更新時(shí)間:2022-08-16 | 點(diǎn)擊率:1019
胎牛血清
是通過從胎牛血漿中去除纖維蛋白形成的非常復(fù)雜的混合物。它含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,其大部分成分是已知的,但有些尚不清楚。這些物質(zhì)在促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長方面達(dá)到生理平衡。
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未暴露于外界,抗體含量明顯低于新生牛和小牛血清,因此抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑。調(diào)整在細(xì)胞培養(yǎng)中主要起到以下作用:
1、提供維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中缺乏或少的營養(yǎng)物質(zhì)以及主要的低分子營養(yǎng)物質(zhì)。
2、提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬等激素,并能與它們所結(jié)合的物質(zhì)結(jié)合或調(diào)節(jié)其活性。
3、在某些情況下,結(jié)合蛋白可以與有毒金屬和熱原結(jié)合來解毒。
4、是細(xì)胞在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上粘附和鋪展所需的因子來源。
5、作為pH緩沖劑。
6、提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞傳代過程中剩余的胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞免受損傷。
7、參與細(xì)胞冷凍保存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的胎牛血清濃度大多為5%~20%(常見的是10%)。具體到不同的實(shí)驗(yàn),最佳濃度應(yīng)根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的組成來確定。
胎牛血清應(yīng)在-20℃保存,干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,以保證血清中因子的活性不受影響,保證血清的優(yōu)良品質(zhì)。將血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混合,制成新鮮的*培養(yǎng)基。(整個(gè)操作需要在無菌超凈臺上進(jìn)行,注意無菌操作。)
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